棉纤维含糖测量法 不莱梅苔黑素测定法

(一)国外测定法
根据不莱梅纤维研究所A.schcnck博士的研究成果,不莱梅苔黑素测定法为检测有黏性倾向且含糖集中的棉纤维提供了一种可靠的方法。它能将全部的糖分别出来,并和苔黑素形成有色络合物,使反应具有特异性。
1.测定原理
将苔黑素(3,5-二羟基甲苯)的浓硫酸溶液加到棉纤维的水萃取物中,可使低糖和多糖分解成糠醛衍生物,和苔黑素生成明显的红色络合物,随着糖液中总糖含量的不同,生成络合物后溶液的颜色从柠檬黄到深红呈现出不同的颜色系列。通过和标准色卡比较,可检测萃取物中的含糖浓度。
2.测定步骤
(1)配制试剂:将0.2g3,5-二羟基甲苯溶化在100g95%～97%的浓硫酸中,在10℃的冷藏条件下静置约一星期。
(2)测定方法:将制备好的1g棉纤维试验试样放入50mL的两次蒸馏水中,摇动15min。
为了加快测定速度,可用1根移液管将1mL溶液移入试管中,从一瓶制备好的苔黑素溶液中取2mL加入试管,轻轻摇动后即出现显色反应(注意溶液会发热),10min后用一套标准色卡便可确定溶液的含糖浓度(目视)。若用完度计检测溶液颜色的透明度,须在有色的测定溶液中加入两次蒸馏水至25mL,将完度计设置在420nm波长,以水为对比,测定其透明度。

图显示出不同成分的糖形成了有区别的颜色透明度。这一方法特别适用于定性测定,但也可采纳苔黑素法检测全部糖的成分。比较左图中的几条曲线,说明不同的糖会和同量苔黑素溶液形成不同的颜色深度。这种方法可通过颜色深度或完度值估算出棉纤维中蜜露的含量,如果想用该法定量测定各种不同的糖分,必须使不同的糖分能顺利地通过苔黑素检验。
用不莱梅苔黑素法检测棉纤维上的蜜露时,若棉纤维上蜜露值超过或等于色标上的5时,则有黏性。 不莱梅苔黑素测定法属于全糖测定法。由于糖在分解成糠醛衍生物时,要求的条件比较苛刻,因而该方法的普及性不好。
(二)国内测定法
国内称不莱梅苔黑素测定法为定量法,是参照德国不莱梅的苔黑素试验法进行测定的方法。根据GB/T16258—1996标准,此法是用3,5-二羟基甲苯—硫酸溶液作显色剂,使用分完完度计定量测定棉花含糖量的试验方法。
1.测定原理
在非离子表面活性剂的作用下,使棉纤维上的糖溶于水中,糖在强酸性介质中转化为醛类,和3,5-二羟基甲苯发生显色反应,生成橙黄色化合物,用分完完度计在425nm处和标准工作曲线比较定量。
2.试剂和材料
(1)蒸馏水(下面全部水指蒸馏水)。
(2)硫酸(浓度1.84g/mL)。
(3)3,5-二羟基甲苯。
3,5-二羟基甲苯—硫酸溶液:称取3,5-二羟基甲苯0.2g,置于100mL烧杯中,加入100g(约54mL)硫酸,搅拌使之全部溶化。现用现配。
(4)脂肪酸烷醇酰胺(尼纳尔,工业级)。
①测定用脂肪酸烷醇酰胺(0.04%)溶液:称取0.4g脂肪酸烷醇酰胺溶于1000mL水中,搅拌均匀。
②提取用脂肪酸烷醇酰胺(0.005%)溶液:量取测定用脂肪酸烷醇酰胺溶液100mL,溶于700mL水中,搅拌均匀。
(5)D-果糖。
①糖标准储备溶液:称取D-果糖0.200g,用水溶化后转入100mL容量瓶中,用水稀释至刻度。浓度为2.0mg/mL。
②糖标准工作溶液:用移液管吸取0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL糖标准储备溶液,分别注入50mL容量瓶中,用水稀释至刻度,该糖标准系列浓度分别为0１020mg/mL、0.040mg/mL、0.060mg/mL、0.080mg/mL、0.10mg/mL、0.12mg/mL、0.16mg/mL、0１20mg/mL。
3.主要仪器及器具
(1)分完完度计:波长200～800nm。
(2)天平:分度值0.01g、0.001g。
(3)振荡器:>200次/min。
(4)恒温水浴锅。
(5)250mL磨
4.试验样液打算
(1)试验室样品:按GB6097—1985规定抽取实验室样品。
(2)试验样品:从实验室样品中随机抽取不少于15g的试验样品。
(3)试验试料:去除试验样品中粗大杂质,充分混合(或用混样品),从中称取3份作为试料,每份试料重2.0g±0.1g。余样备用。
5.测定步骤
(1)试样溶液的配制:取3份试料,分别置于250mL锥形瓶中。加入0.005%脂肪酸烷醇酰胺溶液200mL,在振荡器上振荡10min。用玻璃棒将棉花翻过后继续振荡10min,用定量滤纸过滤,得到3份试料溶液。
(2)空白试验:吸取0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液1.0mL,注于25mL比色管中。将比色管置于70℃恒温水浴锅中,快速加入3,5-二羟基甲苯—硫酸溶液2.0mL,摇匀,继续置于水浴锅中40min,取出,加入0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液20mL,摇匀,冷却至室温,用0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液定容至刻度。将仪器调整好,在425nm波长处测定溶液的吸完值,记录其读数,保留两位小数。
(3)工作曲线绘制:吸取糖标准工作溶液各1.0mL,注于25mL比色管中。重复步骤(2)。
以吸完值为纵坐标、糖的标准工作溶液浓度(mg/mL)为横坐标绘制工作曲线。
6.结果计算
用试料溶液的吸完值减去空白溶液的吸完值,在工作曲线上查出试料溶液的浓度,按下式计算糖的含量。

式中:X———试料含糖率;
c———在标准曲线上查得试料溶液中糖的浓度值,mg/mL;200———预处理试料时所加脂肪酸烷醇酰胺溶液量,mL;2×1000———试料重量,mg。
所得结果修约至两位小数。以三次试验结果的算术平均值作为该试料的平均含糖量。本方法适用于棉纤维所含全糖的定量测定,是测定棉纤维含糖比较精确的一种方法。